当前位置: 首页>组学服务>TMT

TMT

 TMT技术是由美国Thermo Scientific公司研发的一种多肽体外标记技术。该技术采用2种、6种或10种同位素的标签,特异性标记多肽的氨基基团,经过串联质谱LC-MS/MS分析,可同时比较2组,6组或最多10组不同样品中蛋白质的相对含量。

技术原理

TMT™标签由三部分组成:分子量报告基团、分子量标准化部分和反应基团,形成2种、6种或10种相对分子量相等的标签。

 TMT™试剂通过反应基团能够高效地标记酶解后的肽段。在一级质谱图中,分子量标准化部分使任何一种TMT™试剂标记的不同样本中的同一肽段表现为相同的质荷比。在串联质谱中,报告基团优先断裂,释放报告离子。每个报告离子都有各自独特的分子量,并且能够在MS/MS分析中反应出所标记的多肽的样品丰度,根据报告离子的信号强度值可获得样品间相同肽段的定量信息,再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。

技术流程
技术优势

1.高通量:能同时对10组样本中包含的蛋白进行鉴定及表达差异分析,可实现3样品3次重复的实验设计。
2.适用范围广:可用于各种类型生物样本,样品类型包括:胞浆蛋白、膜蛋白、核蛋白、胞外蛋白等。
3.灵敏度高:可检测出低丰度蛋白、强碱性蛋白、小于10KD或大于200KD的蛋白。
4.高效:液质连用,自动化操作,分析速度快,分离效果好。

应用领域

生物标志物筛选
药物作用靶点研究
蛋白混合物或重组蛋白混合物精确定量

上篇:SILAC

下篇:靶向蛋白质组MRM